無菌室一般是在微生物實驗室內(nèi)專辟一個小房間??梢杂冒宀暮筒AЫㄔ?。面積不宜過大,約 4 — 5 平方米即可,高 2.5 米左右。無菌室外要設(shè)一個緩沖間,緩沖間的門和無菌室的門不要朝向同一方向,以免氣流帶進(jìn)雜菌。無菌室和緩沖間都必須密閉。室內(nèi)裝備的換氣設(shè)備必須有空氣過濾裝置。
無菌室的使用與管理編輯 語音
(1) 無菌室應(yīng)保持清潔整齊,室內(nèi)僅存放必須的檢驗用具如酒精燈、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接種環(huán)、玻璃鉛筆等。&不要放與檢測無關(guān)的物品
(2) 室內(nèi)檢驗用具及凳桌等保持固定位置,不隨便移動。
(3) 每2—3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作臺、門、窗、桌、椅及地面,然后用3%石炭酸水溶液噴霧空氣,后紫外燈半小時
(4) 定期檢查室內(nèi)空氣無菌狀況,數(shù)應(yīng)控制在10個以下,發(fā)現(xiàn)不符合要求時,應(yīng)立即徹底。/無菌室無菌程度的測定方法:取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養(yǎng)基平板各3個(平板直徑均9厘米),置無菌室各工作位置上,開蓋曝露半小時,然后倒置進(jìn)行培養(yǎng),測總數(shù)應(yīng)置37℃溫箱培養(yǎng)48小時;測霉菌數(shù)則應(yīng)置27℃溫箱培養(yǎng)5天。`霉菌總數(shù)均不得超過10個為 。
(5) 無菌室前,應(yīng)將所有物品置于操作之部位(待檢物例外),然后打開紫外燈30分鐘,時間一到,關(guān)閉紫外燈待用
(6) 進(jìn)入無菌室前,必須于緩沖間更換過的工作服、工作帽及工作鞋。
(7) 操作應(yīng)嚴(yán)格按照無菌操作規(guī)定進(jìn)行,操作中少說話,不喧嘩,以保持環(huán)境的無菌狀態(tài)。
(8)吸取菌液時,必須用吸耳球吸取,切勿直接用口接觸吸管,如吸管碰到手及其它未的物體,必須重 新 更 換 ,以 防污染 。
(9) 接種針每次使用前后,必須通過火焰燃燒,待冷卻后,方可接種培養(yǎng)物 。
(10)帶有菌液的吸管、試管等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%的來蘇兒溶液的桶內(nèi),24h 取出沖洗;培養(yǎng)皿則需在高壓器中重新后方可處理營養(yǎng)基,切記不要直接沖入下水道中,防止阻塞。如有菌液灑在桌上或地上,應(yīng)立即用 5%石碳酸溶液或 3%的來蘇兒傾覆在被污染處至少 30min,再做處理,工作衣帽等受到菌液污染時,應(yīng)立即脫去,高壓蒸汽后洗滌 。
微生物檢驗用器材及場所必須進(jìn)行或處理,不同的對象采用不同的處理方法
1. 高壓蒸汽: 工作服、口罩、稀釋液等,置高壓鍋內(nèi),一般采用121℃半小時,當(dāng)然不同的培養(yǎng)基有不同的要求,應(yīng)分別處理
2. 火焰:接種針、接種環(huán)等可直接火焰
3. 高溫干燥: 各種玻璃器皿、注射器、吸管等,置于燥箱中160℃2小時
4. 一 般: 無菌室內(nèi)的凳、工作臺、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無法進(jìn)行,必須用其他方法進(jìn)行處理,采用2%石炭酸或來蘇兒水溶液擦拭,工作人員的手也用此法進(jìn)行
5. 空氣的: 開啟紫外燈照射30—60分鐘 即可。
無菌室外源性污染源,主要是通過門和無菌室內(nèi)外通道侵入的室外空氣。因此無菌室的布置通常都采用按照工藝操作的關(guān)鍵程度,潔凈度的高低由里往外逐級減弱,抵御室外污染空氣的侵入。同時為物料和人員進(jìn)出無菌室設(shè)置相應(yīng)的控制措施,例如物料的氣閘、人員的無菌更衣系統(tǒng)以及室內(nèi)廢棄物傳遞出來的通道等。無菌室內(nèi)的污染源,主要來自于無菌室內(nèi)必要的操作人員和部分工藝設(shè)備,通常無菌室內(nèi)操作人員的四周區(qū)域是潔凈度差的區(qū)域,也是無菌技術(shù)中重要的控制內(nèi)容。