規(guī)程
1.無(wú)菌室應(yīng)設(shè)有無(wú)菌操作間和緩沖間,無(wú)菌操作間潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級(jí),室內(nèi)溫度保持在18-24℃,濕度保持在45-65%。超凈臺(tái)潔凈度應(yīng)達(dá)到100級(jí)。
2.無(wú)菌室應(yīng)保持清潔,嚴(yán)禁堆放雜物,以防污染。
3.嚴(yán)防一切器材和培養(yǎng)基污染,已污染者應(yīng)停止使用。
4.無(wú)菌室應(yīng)備有工作濃度的液,如5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液,等等。
5.無(wú)菌室應(yīng)定期用適宜的液清潔,以保證無(wú)菌室的潔凈度符合要求。
6.需要帶入無(wú)菌室使用的儀器,器械,平皿等一切物品,均應(yīng)包扎嚴(yán)密,并應(yīng)經(jīng)過(guò)適宜的方法。
7.工作人員進(jìn)入無(wú)菌室前,必須用肥皂或液洗手,然后在緩沖間更換專(zhuān)用工作服,鞋,帽子,口罩和手套(或用75%的乙醇再次擦拭雙手),方可進(jìn)入無(wú)菌室進(jìn)行操作。
8.無(wú)菌室使用前必須打開(kāi)無(wú)菌室的紫外燈輻照30分鐘以上,并且同時(shí)打開(kāi)超凈臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)。操作完畢,應(yīng)及時(shí)清理無(wú)菌室,再用紫外燈輻照30分鐘。
9.供試品在檢查前,應(yīng)保持外包裝完整,不得開(kāi)啟,以防污染。檢查前,用75%的酒精棉球外表面。
10.每次操作過(guò)程中,均應(yīng)做陰性對(duì)照,以檢查無(wú)菌操作的可靠性。
11.吸取菌液時(shí),必須用吸耳球吸取,切勿直接用口接觸吸管。
12.接種針每次使用前后,必須通過(guò)火焰灼燒,待冷卻后,方可接種培養(yǎng)物。
13.帶有菌液的吸管,試管,培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來(lái)蘇爾溶液的桶內(nèi),24小時(shí)后取出沖洗。
14.凡帶有活菌的物品,必須經(jīng)后,才能在水下沖洗,嚴(yán)禁污染下水道。
要求
1.工作室應(yīng)矮小、平整,面積只需4米2左右,高2.2—2.3米,內(nèi)部裝修應(yīng)平整、光滑,無(wú)凹凸不平或棱角等,四壁及屋頂應(yīng)用不透水之材質(zhì),便于擦洗及
2.室內(nèi)采光面積大,從室外應(yīng)能看到室內(nèi)情況。
3.為保證無(wú)菌室的潔凈,無(wú)菌室周?chē)柙O(shè)緩沖走廊,走廊旁再設(shè)緩沖間,其面積可小于無(wú)菌室。
4.無(wú)菌室、緩沖走廊及緩沖間均設(shè)有日光燈及供空氣用紫外燈,紫外燈離工作臺(tái)以1米為宜 ,其電源開(kāi)關(guān)均應(yīng)設(shè)在室外。
5.無(wú)菌室與緩沖間進(jìn)出口應(yīng)設(shè)拉門(mén),門(mén)與窗平齊,門(mén)縫要封緊,兩門(mén)應(yīng)錯(cuò)開(kāi),以免空氣對(duì)流造成污染。
微生物檢驗(yàn)用器材及場(chǎng)所必須進(jìn)行或處理,不同的對(duì)象采用不同的處理方法
1. 高壓蒸汽: 工作服、口罩、稀釋液等,置高壓鍋內(nèi),一般采用121℃半小時(shí),當(dāng)然不同的培養(yǎng)基有不同的要求,應(yīng)分別處理
2. 火焰:接種針、接種環(huán)等可直接火焰
3. 高溫干燥: 各種玻璃器皿、注射器、吸管等,置于燥箱中160℃2小時(shí)
4. 一 般: 無(wú)菌室內(nèi)的凳、工作臺(tái)、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無(wú)法進(jìn)行,必須用其他方法進(jìn)行處理,采用2%石炭酸或來(lái)蘇兒水溶液擦拭,工作人員的手也用此法進(jìn)行
5. 空氣的: 開(kāi)啟紫外燈照射30—60分鐘 即可。
無(wú)菌室外源性污染源,主要是通過(guò)門(mén)和無(wú)菌室內(nèi)外通道侵入的室外空氣。因此無(wú)菌室的布置通常都采用按照工藝操作的關(guān)鍵程度,潔凈度的高低由里往外逐級(jí)減弱,抵御室外污染空氣的侵入。同時(shí)為物料和人員進(jìn)出無(wú)菌室設(shè)置相應(yīng)的控制措施,例如物料的氣閘、人員的無(wú)菌更衣系統(tǒng)以及室內(nèi)廢棄物傳遞出來(lái)的通道等。無(wú)菌室內(nèi)的污染源,主要來(lái)自于無(wú)菌室內(nèi)必要的操作人員和部分工藝設(shè)備,通常無(wú)菌室內(nèi)操作人員的四周區(qū)域是潔凈度差的區(qū)域,也是無(wú)菌技術(shù)中重要的控制內(nèi)容。