規(guī)程

1.無菌室應(yīng)設(shè)有無菌操作間和緩沖間，無菌操作間潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級(jí)，室內(nèi)溫度保持在18-24℃，濕度保持在45-65%。超凈臺(tái)潔凈度應(yīng)達(dá)到100級(jí)。

2.無菌室應(yīng)保持清潔，嚴(yán)禁堆放雜物，以防污染。

3.嚴(yán)防一切器材和培養(yǎng)基污染，已污染者應(yīng)停止使用。

4.無菌室應(yīng)備有工作濃度的液，如5%的甲酚溶液，75%的酒精，0.1%的新潔爾滅溶液，等等。

5.無菌室應(yīng)定期用適宜的液清潔，以保證無菌室的潔凈度符合要求。

6.需要帶入無菌室使用的儀器，器械，平皿等一切物品，均應(yīng)包扎嚴(yán)密，并應(yīng)經(jīng)過適宜的方法。

7.工作人員進(jìn)入無菌室前，必須用肥皂或液洗手，然后在緩沖間更換專用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75%的乙醇再次擦拭雙手)，方可進(jìn)入無菌室進(jìn)行操作。

8.無菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照30分鐘以上，并且同時(shí)打開超凈臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)。操作完畢，應(yīng)及時(shí)清理無菌室，再用紫外燈輻照30分鐘。

9.供試品在檢查前，應(yīng)保持外包裝完整，不得開啟，以防污染。檢查前，用75%的酒精棉球外表面。

10.每次操作過程中，均應(yīng)做陰性對(duì)照，以檢查無菌操作的可靠性。

11.吸取菌液時(shí)，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。

12.接種針每次使用前后，必須通過火焰灼燒，待冷卻后，方可接種培養(yǎng)物。

13.帶有菌液的吸管，試管，培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的桶內(nèi)，24小時(shí)后取出沖洗。

14.凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)后，才能在水下沖洗，嚴(yán)禁污染下水道。

當(dāng)前無菌室多存在于微生物工廠，一般實(shí)驗(yàn)室則使用超凈臺(tái)。超凈臺(tái)其主要功能是利用空氣層流裝置排除工作臺(tái)面上部包括微生物在內(nèi)的各種微小塵埃。通過電動(dòng)裝置使空氣通過過濾器具后進(jìn)入工作臺(tái)面，使臺(tái)面始終保持在流動(dòng)無菌空氣控制之下。而且在接近外部的一方有一道高速流動(dòng)的氣簾防止外部帶菌空氣進(jìn)入。

在條件較困難的地方，也可以用木制無菌箱代替超凈臺(tái)。無菌箱結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，便于移動(dòng)，箱正面開有兩個(gè)洞，不操作時(shí)用推拉式小門擋住，操作時(shí)可以將雙臂伸進(jìn)去。正面上部裝有玻璃，便于在內(nèi)部操作，箱內(nèi)部裝有紫外線燈，從側(cè)面小門可以放進(jìn)去器具和菌種等。

無菌室外源性污染源，主要是通過門和無菌室內(nèi)外通道侵入的室外空氣。因此無菌室的布置通常都采用按照工藝操作的關(guān)鍵程度，潔凈度的高低由里往外逐級(jí)減弱，抵御室外污染空氣的侵入。同時(shí)為物料和人員進(jìn)出無菌室設(shè)置相應(yīng)的控制措施，例如物料的氣閘、人員的無菌更衣系統(tǒng)以及室內(nèi)廢棄物傳遞出來的通道等。無菌室內(nèi)的污染源，主要來自于無菌室內(nèi)必要的操作人員和部分工藝設(shè)備，通常無菌室內(nèi)操作人員的四周區(qū)域是潔凈度差的區(qū)域，也是無菌技術(shù)中重要的控制內(nèi)容。