天狼猩紅染色觀察Ⅰ型膠原 膠原纖維分型-上海鄭核

一、實驗器材及試劑

1、實驗器材

名稱 廠家 型號

脫水機 武漢俊杰電子有限公司 JJ-12J

包埋機 武漢俊杰電子有限公司 JB-P5

病理切片機 上海徠卡儀器有限公司 RM2016

凍臺 武漢俊杰電子有限公司 JB-L5

組織攤片機 浙江省金華市科迪儀器設(shè)備有限公司 KD-P

烤箱 天津市萊玻瑞儀器設(shè)備有限公司 GFL-230

載玻片 Servicebio

正置光學(xué)顯微鏡 日本尼康 Nikon Eclipse E100

成像系統(tǒng) 日本尼康 Nikon DS-U3

2、主要實驗試劑

試劑名稱 廠家 貨號

無水乙醇 國藥集團化學(xué)試劑有限公司 100092683

二甲苯 國藥集團化學(xué)試劑有限公司 10023418

天狼猩紅染液 Servicebio G1018

中性樹膠 國藥集團化學(xué)試劑有限公司 10004160

二、實驗步驟

1、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自來水洗。

2、天狼猩紅染色：切片入天狼猩紅染液中染色8-10min，兩缸或三缸無水乙醇脫水；

3、脫水封片：切片再放入干凈的二甲苯透明5min，中性樹膠封片。

4、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。

三、結(jié)果判讀：

光學(xué)顯微鏡下膠原纖維紅色，背景黃色；偏振光下，Ⅰ型膠原呈橘黃色或亮紅色的粗纖

維，Ⅲ型膠原呈綠色的細纖維。

四、注意事項：

1、無水乙醇脫水時應(yīng)控制程度，片子不能殘留多余的染液，也不能影響黃色的背景。

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