甲苯胺藍(lán)染色觀察尼氏體呈深藍(lán)色-上海鄭核

一、實驗器材及試劑

1、實驗器材

名稱 廠家 型號

脫水機 武漢俊杰電子有限公司 JJ-12J

包埋機 武漢俊杰電子有限公司 JB-P5

病理切片機 上海徠卡儀器有限公司 RM2016

凍臺 武漢俊杰電子有限公司 JB-L5

組織攤片機 浙江省金華市科迪儀器設(shè)備有限公司 KD-P

烤箱 天津市萊玻瑞儀器設(shè)備有限公司 GFL-230

載玻片 Servicebio

正置光學(xué)顯微鏡 日本尼康 Nikon Eclipse E100

成像系統(tǒng) 日本尼康 Nikon DS-U3

2、主要實驗試劑

試劑名稱 廠家 貨號

二甲苯 國藥集團化學(xué)試劑有限公司 10023418

甲苯胺藍(lán)染液 Servicebio G1032

冰醋酸 Servicebio G10000218

中性樹膠 國藥集團化學(xué)試劑有限公司 10004160

二、實驗步驟

1、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自來水洗。

2、甲苯胺藍(lán)染色：

植物組織切片入染液約2-5min后水洗，鏡檢，根據(jù)組織著色深淺進(jìn)行適當(dāng)?shù)姆只蛘卟环只?，自來水洗后，將切片置于烤箱?nèi)烤干。

動物組織切片入染液5min，水洗，1%的冰醋酸稍分化，自來水洗終止反應(yīng)，顯微鏡下

控制分化程度，自來水洗后，將切片置于烤箱烤干。

3、透明封片：切片入干凈的二甲苯透明5min，中性樹膠封片。

4、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。

三、結(jié)果判讀：

植物組織：木質(zhì)化細(xì)胞壁呈藍(lán)綠色，纖維素細(xì)胞壁呈紫藍(lán)色；

動物組織：腦組織尼氏體呈深藍(lán)色，背景淡藍(lán)色；骨組織軟骨呈紫藍(lán)色，背景淺藍(lán)色；腸組織肥大細(xì)胞呈紫紅色，細(xì)胞核呈淺藍(lán)色，背景淺藍(lán)色。

四、注意事項：

1、染完后的切片不能長時間放在水里，會褪色。

2、組織一定要完全烤干后再封片，避免組織殘留小水珠。

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