瑞氏吉姆薩染色觀察細(xì)胞分型嗜中性粒 嗜酸性 -上海鄭核

一、實驗器材及試劑

1、實驗器材

名稱 廠家 型號

離心機(jī) DRAGONLAB D3024R

載玻片 Servicebio

正置光學(xué)顯微鏡 日本尼康 Nikon Eclipse E100

成像系統(tǒng) 日本尼康 Nikon DS-U3

2、主要實驗試劑

試劑名稱 廠家 貨號

二甲苯 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司 10023418

瑞氏吉姆薩染液套裝 Servicebio G1007

中性樹膠 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司 10004160

二、實驗步驟

1、涂片制備：取細(xì)胞懸液，離心，棄上清液，加適量PBS緩沖液，混勻后取適量滴于載玻片前端，另取一塊邊緣光滑的載玻片做推片，將其一端置于液滴前方，向后移動至接觸液滴使液滴均勻分散在推片與載片的接觸處。然后呈30-40°角均勻用力向另一端平穩(wěn)地推出。涂片放置自然晾干。

2、瑞士吉姆薩染色：瑞氏吉姆薩染液蓋滿標(biāo)本30秒，再加入2-3倍體積的PBS染液1-3min，傾去染液，蒸餾水洗凈，鏡檢，快速烤干。

3、透明封片：干凈的二甲苯5min，中性樹膠封片。

4、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。

三、結(jié)果判讀：

紅細(xì)胞數(shù)量多，體積小，無核，呈粉色或肉粉色；嗜中性粒細(xì)胞體積略大于紅細(xì)胞，細(xì)

胞核呈紫藍(lán)色分葉狀，細(xì)胞質(zhì)幾乎無色；嗜酸性粒細(xì)胞體積略大于嗜中性粒細(xì)胞，細(xì)胞

核呈紫色，通常為2葉，細(xì)胞質(zhì)充滿嗜酸性顆粒呈紅色；嗜堿性粒細(xì)胞體積略小于嗜酸

性粒細(xì)胞，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大小不等被染成紫色的嗜堿性顆粒，核1-2葉，胞質(zhì)染成淡藍(lán)色。

淋巴細(xì)胞圓形，體積與紅細(xì)胞相似，核致密染成深紫色。單核細(xì)胞體積，細(xì)胞質(zhì)染

成灰藍(lán)色，核呈腎型或馬蹄型染成紫藍(lán)色。血小板呈紅色小顆粒。

四、注意事項：

1、制作良好的涂片要求厚薄適宜，分布均勻，邊沿整齊。

2、制作的涂片需要充分干燥以防脫片。

3、染色時間可根據(jù)染液濃度，室溫高低，細(xì)胞多少來進(jìn)行調(diào)節(jié)。

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