β-半乳糖苷酶染色衰老細(xì)胞呈藍(lán)色實(shí)驗(yàn)報(bào)告-上海鄭核
一、實(shí)驗(yàn)器材及試劑
1、實(shí)驗(yàn)器材
名稱 廠家 型號
冰凍切片機(jī) Thermo CRYOSTAR NX50
切片刀 上海徠卡儀器有限公司 LEICA 819
載玻片 Servicebio
正置光學(xué)顯微鏡 日本尼康 Nikon Eclipse E100
成像系統(tǒng) 日本尼康 Nikon DS-U3
2、主要實(shí)驗(yàn)試劑
試劑名稱 廠家 貨號
OCT包埋劑 Sakura 4583
β-半乳糖苷酶染色固定液 碧云天生物技術(shù)有限公司 C0602-1
β-半乳糖苷酶染色液A 碧云天生物技術(shù)有限公司 C0602-2
β-半乳糖苷酶染色液B 碧云天生物技術(shù)有限公司 C0602-3
β-半乳糖苷酶染色液C 碧云天生物技術(shù)有限公司 C0602-4
X-Gal溶液 碧云天生物技術(shù)有限公司 C0602-5
甘油明膠封片劑 Servicebio G1402
二、染色步驟
1、工作液配制:染色液C 930ul,染色液A 10ul,染色液B 10ul,X-Gal溶液50ul,依次
加入,混勻即為工作液。
2、固定:取一張沒經(jīng)過固定的新鮮冰凍切片自然晾干,β-半乳糖苷酶固定液固定15min,傾去固定液,蒸餾水洗3遍;
3、β-半乳糖苷酶染色:甩干片子上的水,將工作液滴于組織上,于37℃孵育16至18h。
4. 傾去工作液,蒸餾充分水洗3次。
5. 甘油明膠封片劑封片。
三、結(jié)果判讀:
衰老細(xì)胞呈藍(lán)色。
四、注意事項(xiàng):
1、標(biāo)本需要是新鮮的冰凍切片或細(xì)胞,不能經(jīng)過固定。
2、染液需要在-20℃的條件下儲存,保質(zhì)期一年。
3、工作液要現(xiàn)配現(xiàn)用,不可保存。
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